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計量論壇

標題: 酶標儀靈敏度指標中吸光度值一般多少？ [打印本頁]

作者: ofooo 時間: 2013-3-25 22:05
標題: 酶標儀靈敏度指標中吸光度值一般多少？

根據規程JJG 861-2007酶標分析儀檢定規程，靈敏度≥0.01，所用濃度為5mg/L，則測得的吸光度不得小于0.05。

我偷懶，沒有做過這個指標，也沒配過這個溶液。

只能參照【楊青成，酶標儀校準方法探討，臨床血液學雜志，2011，２4（４）】中，溶液厚度為5mm、濃度為0.0313%的重鉻酸鉀吸光度值是0.222，則假設厚度相同，換算成5mg/L重鉻酸鉀濃度時吸光度為0.0035，算出靈敏度0.0007，與規程差的太遠。即使假設規程中樣品溶液厚度達到1cm，吸光度也才增加1倍。

問題出在哪呢？不知道有哪位測過？麻煩告訴我個大概值，謝謝！

作者: ofooo 時間: 2013-3-27 20:15
回復 1# ofooo

沒人回復，自己頂一個吧
從理論和時間表明，規程給出的指標≥0.01/（mg/L）的指標是錯的，應該更改為≥0.01Abs
根據【馬萱，分光光度計波長誤差及靈敏度校核初探，武漢工業大學學報，1992,14】中Cr的eb=0.0055左右（b估計是1cm）
規程中假設液層厚0.5cm，濃度為5mg/L，則A=ebc=0.0055*5/2=0.014
當然，實際液層厚度可能大于0.5cm，但一般不會高于1cm，所以理論吸光度值在0.014-0.028之間
實測某兩臺酶標靈敏度結果是0.015和0.012左右

作者: 劉彥剛 時間: 2013-3-27 22:07

回復 ofooo

沒人回復，自己頂一個吧
從理論和時間表明，規程給出的指標≥0.01/（mg/L）的指標是錯的，應該更改為≥0.01Abs
根據【馬萱，分光光度計波長誤差及靈敏度校核初探，武漢工業大學學報，1992,14】中Cr的eb=0.0055左右（b估計是1cm）
規程中假設液層厚0.5cm，濃度為5mg/L，則A=ebc=0.0055*5/2=0.014
當然，實際液層厚度可能大于0.5cm，但一般不會高于1cm，所以理論吸光度值在0.014-0.028之間
實測某兩臺酶標靈敏度結果是0.015和0.012左右ofooo 發表于 2013-3-27 20:15

張博：
1、你復述的靈敏度要求是≥0.01mg/L，還是≥0.01L/mg？規程給出的可是≥0.01L/mg。
2、你說的實測某兩臺酶標靈敏度結果是0.015和0.012左右，是0.015和0.012左右L/mg；還是0.015和0.012左右Abs？

作者: ofooo 時間: 2013-3-28 08:05
回復 3# 劉彥剛

規程寫的是≥0.01Abs/（mg/L），我認為是≥0.01Abs就行了
實測值是0.015Abs和0.012Abs

作者: ofooo 時間: 2013-3-28 08:36

《酶標分析儀》檢定規程的修訂說明和實驗報告.pdf (314.62 KB, 下載次數: 106) 好不容易搞到一篇文獻：《酶標分析儀》檢定規程的修訂說明和實驗報告
里面竟然沒有靈敏度的實驗數據，被“節選”掉了！！！

作者: 劉彥剛 時間: 2013-3-28 12:08

回復劉彥剛

規程寫的是≥0.01Abs/（mg/L），我認為是≥0.01Abs就行了
實測值是0.015Abs和0.012 ...
ofooo 發表于 2013-3-28 08:05

當時我看該規程時就覺得這靈敏度指標有點不好理解，后問到了參加了宣貫的老師說，此處規程沒表達好。據說是測得的吸光度除以濃度5mg/L，所以靈敏度的單位成了L/mg。

作者: 劉彥剛 時間: 2013-3-28 12:12

好不容易搞到一篇文獻：《酶標分析儀》檢定規程的修訂說明和實驗報告
里面竟然沒有靈敏度的實驗數據，被“ ...
ofooo 發表于 2013-3-28 08:36

昨天我向理化計量的資深老師請教了該問題，老師的指導給了我啟示，使我有了新的思路。后經整理我覺得有點思路：這下讓我真正理解了為什么在給定波長，測量給定的重鉻酸標液，測得的結果不能用準確度來量度，而只能用靈敏度量度。因為注在酶標板上的被測溶液的液層厚度，不向比色皿那樣固定，所以即使儀器是很準確的，也無法測得確定的值。
而且，因為受到啟發。對于我們的問題也得到了些想法：因為在酶標板上的被測溶液，也不向比色皿裝著那樣是固定立方體，從某種意義上講，它相當于或是凸鏡、或許是凹鏡的透鏡。這樣一定會偏離朗伯—比爾定律，或許就使吸光度大了。你說有點道理嗎？

作者: 劉彥剛 時間: 2013-3-28 15:13

回復劉彥剛

規程寫的是≥0.01Abs/（mg/L），我認為是≥0.01Abs就行了
實測值是0.015Abs和0.012 ...
ofooo 發表于 2013-3-28 08:05

如果實測值是實測值是0.015L/mg和0.012L/mg，就說明我們的想法是對的；規程給出的指標和規程宣貫時，給出的檢定方法也是對的。

作者: liuwendg 時間: 2015-3-17 15:47
實際上我們并沒有測出靈敏度0.015L/mg和0.012L/mg，而僅僅是按規程方法檢測的吸光度值是0.015和0.012，所以規程還是有問題。

作者: gonglex 時間: 2015-12-15 17:57
靈敏度=吸光值/濃度

作者: ZeroLord 時間: 2020-5-6 16:13
今天剛好遇見這個問題，看了大家的解答，我的想法是如果規程是正確的，靈敏度、吸光度和濃度應該存在某種換算關系，就像6樓和10樓說的這樣，現在也有標準玻片替代標準溶液，設備廠商說原理是一樣的。

作者: gonglex 時間: 2020-6-1 17:01
我也買了標準濾光片，下次檢定點時候用上。

作者: 流氓小浦 時間: 2024-8-20 09:06
我現在也在為這個問題困擾

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