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計(jì)量論壇

標(biāo)題: 酶標(biāo)儀的維修實(shí)例及使用探討 [打印本頁(yè)]

作者: xccyp 時(shí)間: 2008-4-5 10:25
標(biāo)題: 酶標(biāo)儀的維修實(shí)例及使用探討
酶標(biāo)儀的維修實(shí)例及使用探討
　酶標(biāo)儀在實(shí)際應(yīng)用中很廣泛, 如應(yīng)用在臨床鑒別乙肝兩對(duì)半, HIV 等很多方面。在臨床實(shí)驗(yàn)方面應(yīng)用在鑒定DNA 等許多方面, 可以說(shuō)它是臨床及醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)不可或缺的基礎(chǔ)設(shè)備。
故障一: 測(cè)量的結(jié)果重現(xiàn)性不好, 即使用空板測(cè)量誤差也在允許的范圍之外。
故障分析: 檢查試劑發(fā)現(xiàn)沒(méi)有問(wèn)題, 檢查判定公式也沒(méi)有問(wèn)題, 檢查光路也沒(méi)有污染。幾經(jīng)周折終于發(fā)現(xiàn)卡微板的卡簧在伸縮后沒(méi)有卡到位, 造成微板在測(cè)量時(shí)在機(jī)內(nèi)晃動(dòng)影響測(cè)量結(jié)果不準(zhǔn)。

作者: xccyp 時(shí)間: 2008-4-5 10:29
故障二: 測(cè)量結(jié)果OD 值偏低。
故障分析: 排除完燈的能量值偏低后, 檢查發(fā)現(xiàn)濾光片上有灰塵, 用蒸餾水和擦鏡紙擦洗干凈晾
干后故障排除。
測(cè)試方法: 酶標(biāo)儀的儀器指標(biāo)在最佳狀態(tài), 就儀器的精度測(cè)試和儀器的線(xiàn)性度介紹幾種測(cè)試方法:
精度測(cè)試: 該過(guò)程可被用于檢測(cè)不同微板之間的測(cè)量精度。使用新制備的在011 % TWEEN20 中
的橘黃色甲基填充微孔, 在每個(gè)微孔中使用不同稀釋度的溶劑以便獲得一個(gè)光密度范圍, 首先確保每孔注入200mL 液體, 使用492 nm 慮光片測(cè)量至少3, 對(duì)每一微孔進(jìn)行下列計(jì)算: (1) 平均OD 值;(2) 最高和最低值; (3) 平均值。最高和最低值之間的差值和百分比。讀數(shù)范圍在01000 到21000Abs。同一孔平均值, 最高值和最低值之間的差值應(yīng)該在+ / - 110 %和+ / - 01010 OD 范圍內(nèi)。
讀數(shù)范圍在21000 到31000Abs 同一孔平均值, 最高和最低值之間的差值應(yīng)在+ / - 110 %和+ /01005OD 值范圍內(nèi)。讀數(shù)范圍在31000Abs 以上時(shí)準(zhǔn)確度不符合要求。儀器線(xiàn)性度: 儀器的線(xiàn)性度可使用一種溶劑的稀釋系列得到。如可在492 nm 處測(cè)量在011 %
TWEEN20 中的橘黃色甲基的稀釋系列, 具體方法如下: 在參考光密度計(jì)上測(cè)量被稀釋的溶劑, 畫(huà)出D 值對(duì)已知濃度的點(diǎn)圖, 并畫(huà)出通過(guò)這些點(diǎn)的最好的直線(xiàn)。將從系列稀釋中測(cè)得的吸光度值與該圖比較從而計(jì)算出各稀釋度的濃度。微板中每種稀釋度加入250μL , 對(duì)每種稀釋至少使用兩個(gè)樣本, 以便降低因加樣引起的誤差。
測(cè)量微板使用精確測(cè)量模式, 利用測(cè)量得到的平均OD 值和每個(gè)樣本的已知濃度畫(huà)一條OD 濃度的曲線(xiàn), 從系列稀釋中測(cè)得的吸光值與該曲線(xiàn)比較從而計(jì)算出各稀釋度的濃度。對(duì)光度記和本儀器,比較計(jì)算的濃度,不準(zhǔn)確度不應(yīng)大于以下,使用標(biāo)準(zhǔn)濾光片492nm 時(shí)吸光度在01000～21000Abs + / - 1 %、21000～31000Abs + / - 115 %。使用梯度濾光片2 nm時(shí), 吸光度在01000～21500Abs + / - 2 %。

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