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[色譜/質譜] 液相色譜常見故障及排除

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1#
csxfjsw123 發表于 2007-7-27 10:07:49 | 只看該作者 回帖獎勵 |倒序瀏覽 |閱讀模式
液相色譜常見故障及排除
柱壓升高
色譜柱入U濾片被流動相或樣品中顆粒堵住。
樣品組分在濾片上沉淀堵住濾片。
卸下入口接頭的濾片,使用1:1的硝酸溶液超聲清洗5min,再用水、
甲醇清洗除去水份。
樣品及流動相使用0.45μm濾膜除去微量雜質。
使用流動相作溶劑配制樣品。
新柱柱效低
柱外死體積大。
樣品在流動相中溶解不好,影響傳質過程。
更換連接管,重新連接色譜柱,降低死體積。
使用合適的流動相或使用流動相溶解樣品。
舊色譜柱柱效低,分離不好,柱入口床層塌陷。
填料被流動相溶蝕而流失。
用同型填料填補柱效可部分恢復。
對硅膠質填料,流動相PH值在2—7范圍內,否則可能被溶蝕。
舊色譜柱柱效低分離不好,有時出現雙峰。
入門填料被污染變質所致。
用強溶劑沖洗。
刮除被污染的床層,用同型的填料填補柱效可部分恢復。
污染嚴重,則廢棄或重新填裝。
新柱接到儀器上后,柱頭漏液。
柱接頭與儀器之間連接管的壓環變形量不夠。
用扳手順時針方向擰緊1/4圈直到不漏液為止。
新柱接到儀器上后,啟動儀器沒有柱壓降。
柱放置時間過長柱內充裝的液體己揮發干。
繼續開泵,用流動相將柱內氣體置換掉。
新柱接到儀器上后,檢測器出口不斷有小氣泡出
現。
①同上。
② 流動相脫氣不徹底特別是MeOH/H20體系由于氫鍵作用很容易出現氣泡。
①同上。
②配好流動相后一定要進行脫氣處理。
新柱接到儀器上后柱壓降不斷增加,甚至超過儀器的耐壓限。
柱入口濾片被固體顆粒堵塞(或被毒
菌堵塞)。
更換或清洗柱入口濾片;用0.45μm過濾膜過濾流動相除去微小顆粒物。
進樣次數增加柱壓降逐漸增加。
①樣品中含有不溶于流動相的微小顆粒物。
②樣品在流動相中析出微小結晶。
①用0.45μm過濾膜過濾樣品。
②推薦使用流動相溶解樣品。
使用—段時間后,柱效下降,分離不好。
①柱填料被流動相溶解而流失。
②柱填料被樣品雜質污染。
①推薦使用予柱。如柱床層塌陷,用相同型號填料填補。
②推薦使用保護柱或用強溶劑沖洗色譜柱除去污染雜質。
柱使用一段時間后,柱效下降出現雙峰。
柱入口床層被污染使柱填料變質。
用強溶劑沖洗除去雜質。
柱使用—段時間后,柱效下降,出現峰拖尾。
柱入口床層被污染。
用強溶劑沖洗20-30ml,若效果不明顯應廢棄。
進樣量增大與峰面積增加不成正比.即進樣量與峰面積不是線性關系。
樣品在流動相中的溶解度小,只有部分樣品被流動相沖如色譜柱中而另一部分則沉積在柱人口端。
①用流動相溶解樣品。
②樣品的濃度不宜太大。
④進樣量不宜過大。
使用緩沖液作流動相時,柱壓降升高很快。
霉菌生長所致。
①在流動相中加入有毒物質或加疊氯化鈉防止霉菌生長。
②實驗結束后先用純水后用MeOH各沖洗20-30ml后關機。
用5μm顆粒填料柱時, 以MeOH/H20作流動相柱壓較高。
MeOH與水之間由于氫鍵作用黏度增大。
可用乙腈/水體系使柱壓降低,分離效率更好。
長時間放置的色譜柱,出現雙峰。
柱床層出現干裂。
柱放置時,最好使用相應的溶劑充填好,防止受大的機械震動,如床層干裂應廢棄掉。
流動相洗滌強度由弱漸強時出現很多雜質峰。
強溶劑將弱溶劑洗不出的雜質沖出來。
不影響柱的性能。
柱使用一段時間后保留值逐漸縮短。
柱中固定相流失所致。
①更換色譜柱。
②檢查所用的色譜條件是否合適。
在U V色譜圖中,靠近死時間處出現負峰。
①進樣時壓力波動所致。
②樣品溶劑比流動相的UV吸收值低。
①采用閥進樣。
②用流動相溶解樣品。


2#
guojunguo 發表于 2012-1-30 10:08:23 | 只看該作者
說明書上應該有吧。
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