Agilent1100液相基本操作步驟

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2008-7-8 15:19 上傳

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Agilent1100液相基本操作步驟
(一)、開機：
    1、打開計算機,進入Windows NT （或Windows 2000）畫面,并運行Bootp Server程序。
     2、打開 1100 LC 各模塊電源。
     3、待各模塊自檢完成后，雙擊Instrument 1 Online圖標，化學工作站自動與1100LC通訊，進入的工作站畫面。
    4、從“View”菜單中選擇“Method and Run control”畫面, 單擊”View”菜單中的“Show Top Toolbar”，“Show status toolbar”，“System diagram”,”Sampling diagram”，使其命令前有“√”標志，來調用所需的界面。
   5、把流動相放入溶劑瓶中。
   6、打開Purge閥。
   7、單擊Pump圖標，出現參數設定菜單，單擊Setup pump選項，進入泵編輯畫面。
   8 、設Flow：5ml/min，單擊OK。
   9、單擊Pump圖標，出現參數設定菜單，單擊Pump control選項，選中On，單擊OK，則系統開始Purge，直到管線內（由溶劑瓶到泵入口）無氣泡為止,切換通道繼續Purge，直到所有要用通道無氣泡為止。
   10、單擊Pump圖標，出現參數設定菜單，單擊Pump Control選項，選中Off，單擊Ok關泵， 關閉Purge  valve。
   11、單擊Pump圖標，出現參數設定菜單，單擊Setup pump選項，進入Pump編輯畫面，設Flow：1.0ml/min。
   12、單擊泵下面的瓶圖標，輸入溶劑的實際體積和瓶體積。也可輸入停泵的體積。單擊Ok。

（二）數據采集方法編輯：
    1、開始編輯完整方法：
     ●從“Method”菜單中選擇“Edit entire method” 項，如上圖所示選中除“Data analysis ”外的三項，單擊Ok，進入下一畫面。
    2、方法信息：
     ●在“Method Comments”中加入方法的信息（如：方法的用途等）。
     ●單擊Ok 進入下一畫面。
    3、泵參數設定：（以二元泵為例）
      ●在“Flow”處輸入流量,如1ml/min，在“Solvent B”處輸入70.0,(A=100-B) ,也可Insert 一行”Timetable” ,編輯梯度。在“Pressure Limits Max”處輸入柱子的最大耐高壓，以保護柱子。
     ●  單擊Ok進入下一畫面。
    4、自動進樣器參數設定:
     ●選擇合適的進樣方式, 進樣體積 1.0ul ,洗瓶位置為6號。“Standard Injection”----只能輸入進樣體積，此方式無洗針功能。“Injection with Needle Wash”----可以輸入進樣體積和洗瓶位置，此方式針從樣品瓶抽完樣品后，會在洗瓶中洗針。“Use injector program”---可以點擊Edit 鍵進行進樣程序編輯。
     ●點擊Ok進入下一畫面。
    5、柱溫箱參數設定:
      ●在”Temperature”下面的方框內輸入所需溫度,并選中它,點擊”more>>” 鍵,如圖所示,選中”Same as left”---使柱溫箱的溫度左右一致。
       ●點擊ok進入下一畫面。
     6、VWD檢測器參數設定:
       ●在”Wavelength”下方的空白處輸入所需的檢測波長,如254nm,  在”Peak width (Response time)”下方點擊下拉式三角框,選擇合適的響應時間, 如>0.1min  (2s)。

       ●在Timetable 中可以“Insert”一行，輸入隨時間切換的波長，如1min  ，波長=300nm。點擊ok進入下一畫面。
     7、DAD檢測器參數設定:
       ●檢測波長: 254nm,BW=30nm,     參比波長=350nm,BW=100nm;  
       ●檢測波長：一般選擇最大吸收處的波長。樣品帶寬BW： 一般選擇最大吸收值一半處的整個寬度。參比波長：一般選擇在靠近樣品信號的無吸收或低吸收區域。參比帶寬BW：至少要與樣品信號的帶寬相等，許多情況下用100nm作為缺省值。Peak width（Response time）：其值盡可能接近要測的窄峰峰寬。Slit—狹縫窄，光譜分辨率高；寬時，噪音低。同時可以輸入采集光譜方式，步長，范圍，閾值。選中所用的燈。
       ●點擊Ok進入下一畫面。
     8、RID檢測器參數設定:
       ●色譜條件:   

進樣體積: 20ul 。
光學單元溫度:  Off 。


極性: 正 。
峰寬(響應時間) :  4s  。
       ●“Optical Unit Temperature”---若環境溫度控制在±2℃,設定為Off,  若環境溫度不穩定,則設定光學單元溫度為高于環境溫度5度,以防樣品在池中沉淀。“Peak width”---大多數分析設為4S，只有在高速分析下設為更短。“Automatic recycling after analysis”---在不進行分析時可以讓流動相循環，節省流動相，檢測器連續運行，可隨時投入使用。
       ●點擊RID圖標，選擇RID  Control ：Heater 設為On，若要循環流動相，必須將“Recycling Valve”設為ON。手動purge 參比池，將其設為On，并輸入Purge 時間。

      9、FLD檢測器參數設定:

色譜條件：

        ●   樣品：P/N 01018-68704  用甲醇稀釋為1:10。
        ●    進樣體積：5ul。
        ●    柱溫箱:  30℃ 。   EX=246nm, EM=317nm ,PMT=10。
        ●    響應時間=4s.     停止時間： 出峰完畢。
        ●    Excitation A: 激發波長:200-700nm,步長為1nm,或Zero Order。
        ●    Emission:  發射波長: 280-900nm, 步長為1nm,或Zero Order。

        ●    PMT: 大多數應用適當的設定值為10,若高濃度樣品峰被切平頭,則減少 PMT 值。
        ●  “Peak width”：大多數應用設為4s，只有快速分析采用小的設定值。
        ●    Multi Ex ： 多波長及光譜（激發）。
        ●    Multi Em：多波長及光譜（發射）。

        ●    同時可以輸入范圍Range、步長step、采集光譜。
      10、在“ Run time checklist ”中選中“Data acquisition”，單擊Ok。
      11、單擊“Method”菜單，選中“Save method as”，輸入一方法名，如“test”，單擊Ok。
      12、從菜單 “View”中選中”Online signal” ,選中Windows 1,然后單擊Change 鈕,將所要繪圖的信號移到右邊的框中,點擊Ok.(如同時檢測二個信號,則重復12,選中Windows 2)。
      13、從“Run  control ”菜單中選擇“Sample info”選項，如上圖所示，輸入操作者名稱，在“Data file ”中選擇“Manual”或“Prefix”。

      區別: Manual--每次做樣之前必須給出新名字,否則儀器會將上次的數據覆蓋。Prefix—在Prefix 框中輸入前綴，在Counter 框中輸入計數器的起始位，儀器會自動命名，如vwd0001，vwd0002……。
     14、從Instrument 菜單選擇System on。
     15、等儀器Ready，基線平穩，從Method菜單中選擇“Run method”，進樣。

（三）、數據分析方法編輯:
    1、從“View”菜單中，單擊“Data analysis”進入數據分析畫面。
    2、從“File”菜單選擇“Load signal”，選中您的數據文件名，如下圖所示。單擊Ok。
    3、做譜圖優化,從“Graphics”菜單中選擇“Signal options”選項，。從Ranges中選擇Auto scale及合適的顯示時間，單擊ok,或選擇”Use Ranges” 調整。反復進行，直到圖的比例合適為止。
    4、積分:
      (1)、從“Integration”中選擇 “Auto integrate”,如積分結果不理想,再從菜單中選擇“Integration  Events”選項，選擇合適的Slope sensitivity，Peak width，Area reject，Height reject。
      (2)、從“Integration”菜單中選擇“Integrate”選項， 則數據被積分。
      (3)、如積分結果不理想，則修改相應的積分參數，直到滿意為止。

      (4)、單擊左邊“√”圖標，將積分參數存入方法。
    5、打印報告:
      (1)、從“Report”菜單中選擇“Specify report”選項，進入如上畫面。
      (2)、單擊“Quantitative  Results”框中Calculate右側的黑三角，選中Percent（面積百分比），其它選項不變。
      (3)、單擊Ok.
      (4)、從“Report”菜單中選擇“Print report”，則報告結果將打印到屏幕上，如想輸出到打印機上，則單擊Report 底部的“Print”鈕。

(四)、關機:
      ●  關機前，用 100%的水沖洗系統20分鐘，然后用有機溶劑沖洗系統10分鐘（如ACN），然后關泵，（適于反相色譜柱）。[正相色譜柱用適當的溶劑沖洗]
      ●  退出化學工作站，及其它窗口，關閉計算機（用shut down關）。
      ●  關掉Agilent 1100電源開關。

[ 本帖最后由 ycjlzxj 于 2008-7-8 20:01 編輯 ]