目的:規(guī)范紫外/可見分光光度計(jì)的校正程序和周期。
2 范圍:適用于紫外/可見分光光度計(jì)的校正。
3 職責(zé):QC人員。
4 程序:
4.1 校正周期:見SOP-VC001。
4.2 檢定項(xiàng)目:752型分光光度計(jì)進(jìn)行波長(zhǎng)準(zhǔn)確度、吸收度準(zhǔn)確度、雜散光、分辨率的檢定;TU-1221型分光光度計(jì)進(jìn)行全部項(xiàng)目的檢定。
4.3 性能檢定:
4.3.1 波長(zhǎng)準(zhǔn)確度及重復(fù)性:
氘燈在可見區(qū)內(nèi)有兩個(gè)非常明顯的特征能量峰,其近似峰位值為651.1nm及486.0nm,重復(fù)三次測(cè)量此特征峰可驗(yàn)證儀器的波長(zhǎng)精度及重復(fù)性。在得到的6個(gè)峰位值中,與標(biāo)準(zhǔn)值相差最大的差值為目前儀器的波長(zhǎng)精密度。三次測(cè)量中最大差值為其重復(fù)性指標(biāo)值。
4.3.2 吸光度準(zhǔn)確度:
精密稱取在120℃干燥至恒重的基準(zhǔn)重鉻酸鉀60.6mg,溶解于1000ml 0.005mol/L硫酸溶液中,置1cm石英池中,用0.005mol/L硫酸溶液作參比測(cè)定溶液的吸收光譜。按下表規(guī)定的波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸收度并計(jì)算其吸收系數(shù)。在附表中吸收度準(zhǔn)確度項(xiàng)下規(guī)定了吸收系數(shù)和允差。將結(jié)果記錄在附表中吸收度準(zhǔn)確度項(xiàng)下。
酸性重鉻酸鉀具有光學(xué)穩(wěn)定性,但在氧化物質(zhì)存在下會(huì)迅速降解,因此配制溶液前要仔細(xì)清洗容器。溶液最長(zhǎng)可放置六個(gè)月。用重鉻酸鉀測(cè)定的吸收度準(zhǔn)確度的任何明顯的系統(tǒng)變化都應(yīng)仔細(xì)解釋,這是由于它是用做基準(zhǔn),且是變化的,如:由于雜質(zhì)存在慢慢降解。
4.3.3 雜散光:
雜散光在370nm處用重鉻酸鉀溶液測(cè)定(0.025% W/V 0.05mol/L氫氧化鉀溶液),將結(jié)果記錄在附表中雜散光項(xiàng)下。
4.3.4 分辨率:
記錄濃度為0.02%的甲苯-己烷溶液的光譜,并計(jì)算269nm和266nm處最大吸收的比率,將結(jié)果記錄在附表中分辨率項(xiàng)下。
4.3.5 基線:
記錄無比色時(shí)的吸收度,在200nm~800nm間吸收度應(yīng)在-0.01A~+0.01A間,在190nm~900nm間I0線(100%透光率線)的波動(dòng)應(yīng)小于2%。
4.4 分光光度計(jì)的任何上述校正不合格,通知實(shí)驗(yàn)室主管,進(jìn)行維修。
4.5 校正數(shù)據(jù)由實(shí)驗(yàn)室主管復(fù)核無誤后更換校正合格證。 |
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